中国乳业 ›› 2023, Vol. 0 ›› Issue (2): 20-25.doi: 10.12377/1671-4393.23.02.04

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褪黑素单克隆抗体的制备

武海新1, 廖晨星2, 常毅2, 马慧2, 刘巧香2, 李有志3, 郭刚2,*, 刘国世1,*   

  1. 1 北京市中国农业大学动物科学技术学院,北京 100193;
    2 北京首农食品集团有限公司,北京 100028;
    3 山东省饲料兽药质量检验中心,山东济南 250109
  • 出版日期:2023-02-25 发布日期:2023-03-10
  • 通讯作者: * 郭 刚(1980-),男,河北河间人,博士,正高级畜牧师,研究方向为奶牛繁育管理及牧场数据研究;刘国世(1972-),男,山东青岛人,博士,教授,研究方向为动物繁殖生理与胚胎生物技术。
  • 作者简介:武海新(1997-),女,辽宁沈阳人,博士在读,研究方向为动物繁殖与配子和胚胎生物技术;廖晨星(1964-),男,河南南阳人,本科,兽医师,研究方向为牧场管理与奶牛健康养殖;常 毅(1963-),男,硕士,高级经济师,研究方向为牧场管理与奶牛健康养殖;马 慧(1981-),女,黑龙江哈尔滨人,博士,高级畜牧师,研究方向为反刍动物营养与饲料;刘巧香(1966-),女,内蒙古人,本科,高级兽医师,研究方向为畜牧健康养殖与疾病防控;李有志(1966-),男,山东烟台人,本科,研究员,研究方向为畜牧业(动物营养与饲料科学)。

Production of Monoclonal Antibody Against Melatonin

WU Haixin1, LIAO Chenxing2, CHANG Yi2, MA Hui2, LIU Qiaoxiang2, LI Youzhi3, GUO Gang2,*, LIU Guoshi1,*   

  1. 1College of Animal Science and Technology,Beijing China Agricultural University,Beijing 100193;
    2Beijing Capital Agribusiness& Foods Group,Beijing 100028;
    3Shandong Feed and Veterinary Drug Quality Inspection Center,Jinan Shandong 250109
  • Online:2023-02-25 Published:2023-03-10

摘要: 褪黑素(MT)广泛存在于哺乳动物体内,是一种常见的吲哚类物质,可起到清除自由基、调节免疫、调节神经等作用。本文使用褪黑素-OVA作为免疫原,免疫5 只BALB/c小鼠,5 次免疫后采血检测,通过间接ELISA方法确定抗血清针对褪黑素-OVA的滴度。经ELISA筛选,最终获得5 株可稳定表达褪黑素抗体的单克隆细胞株(3G3B2、3G3C7、3G3D1、3G3F4、3G3G3)。纯化后抗体浓度为0.28 mg/mL,经测定,褪黑素单克隆抗体滴度可达1∶64 000,为进一步开发褪黑素的快速检测方法奠定了材料基础。

关键词: 褪黑素, 单克隆抗体, 免疫, 细胞融合, ELISA

Abstract: Melatonin (MT),which is widely existed in mammals,is a common indole substance that can play a role in scavenging free radicals,regulating immunity,and regulating nerves. Here,five BALB/c mice were immunized with melatonin -OVA as the immunogen,and blood was collected for detection after five immunizations. The titer of antiserum against melatonin-OVA was determined by indirect ELISA. After ELISA screening,5 monoclonal cell lines(3G3B2,3G3C7,3G3D1,3G3F4 and 3G3G3) stably expressing melatonin antibody were obtained. The concentration of purified antibody was 0.28 mg/mL,and the titer of purified antibody reached 1∶64 000. The melatonin monoclonal antibody produced in this research laid a material foundation for further development of a rapid detection method of melatonin.

Key words: melatonin, monoclonal antibody, immunity, cell fusion, ELISA

[1] Carrillo-Vico A,Lardone PJ,Álvarez-Sánchez N,et al.Melatonin:buffering the immune system[J].International Journal of Molecular Sciences,2013,14(4):8638-8683.
[2] Tamura H,Kawamoto M,Sato S,et al.Long-term melatonin treatment delays ovarian aging[J].Journal of Pineal Research,2017,62:e12381.
[3] Mortezaee K,Potes Y,Mirtavoos-Mahyari H,et al.Boosting immune system against cancer by melatonin:a mechanistic viewpoint[J].Life Sciences,2019,238:116960-116960.
[4] Kim H J,Kim H J,Bae M K,et al.Suppression of osteoclastogenesisby melatonin:amelatonin receptor-independent action[J].International Journal of Molecular Sciences,2017,18(6):1142.
[5] Jones LH.Recent advances in the molecular design of synthetic vaccines[J]. Nature Chemistry,2015,7(12):952-60.
[6] 杨松鑫,冯建远,郭旋,等.小分子化合物单克隆抗体的制备及其在动物医学领域的应用[J].中国畜牧兽医,2021,48(3):1121-1131.
[7] Wang H,Wang H,Huang H,et al.Melatonin attenuates spinal cord injury in mice by activating the nrf2/are signaling pathway to inhibit the nlrp3 inflammasome[J]. Cells,2022,11(18):2809.
[8] Jiang Y H,Shi H C,Liu Y,et al,Applications of melatonin in female reproduction in the context of oxidative stress[J],Oxidative Medicine and Cellular Longevity,2021,e6668365.
[1] 张钰, 邓学梅, 廖晨星, 刘国世. 褪黑素的生物合成及对繁殖性能的影响[J]. 中国乳业, 2023, 0(2): 3-9.
[2] 沈紫霞, 常毅, 刘巧香, 郭刚, 马慧, 李有志, 廖晨星, 刘国世. 牛奶中褪黑素含量的检测方法[J]. 中国乳业, 2023, 0(2): 10-14.
[3] 刘云洁, 常毅, 廖晨星, 刘巧香, 郭刚, 高家瑞, 李有志, 马慧, 刘国世. 乳汁中褪黑素的节律与功能[J]. 中国乳业, 2023, 0(2): 15-19.
[4] 袁晓娟, 吴冬梅, 金鸿, 倪定琴, 姚曼, 余琼, 刘铭英. 4 种呼吸道疫病血清学调查分析——以凯里市A奶牛场为例[J]. 中国乳业, 2023, 0(2): 79-83.
[5] 刘丽平, 张志立, 杜传来. 热处理对牛初乳理化性质和功能性蛋白的影响[J]. 中国乳业, 2022, 0(8): 77-82.
[6] 张立强, 雷静. 宁夏规模牧场犊牛病毒性腹泻流行病学调查[J]. 中国乳业, 2022, 0(4): 68-71.
[7] 彭松悦, 吴海龙, 徐为民, 吴喜娟, 陈欢欢, 车彦, 汪晶, 张淑君. 奶牛初乳与常乳中营养成分和免疫物质的特征[J]. 中国乳业, 2022, 0(11): 111-116.
[8] 沈义媛, 童津津, 熊本海, 蒋林树. 多组学技术在奶牛瘤胃微生物与宿主互作机制中的研究进展[J]. 中国乳业, 2021, 0(8): 68-75.
[9] 张书阅, 熊本海, 刘明, 蒋林树. 酿酒酵母培养物对瘤胃内环境和免疫功能的影响及其在反刍动物上的应用[J]. 中国乳业, 2021, 0(7): 18-24.
[10] 柳国锁, 祁燕蓉, 田雪. 宁夏地区部分规模奶牛场牛病毒性腹泻病的流行、防控与净化[J]. 中国乳业, 2021, 0(5): 47-50.
[11] 王晨豫, 魏勇, 陈杰, 曹梦园, 陈明杰, 齐亚银. 新疆某规模化奶牛场牛传染性鼻气管炎病毒抗体水平检测[J]. 中国乳业, 2021, 0(12): 90-93.
[12] 李建立. 酸奶营养品质提升的加工工艺研究[J]. 中国乳业, 2021, 0(12): 122-128.
[13] 陈星星, 周春元, 赵欣雅, 田雨佳, 张学炜. 犊牛饲养福利关键点及生产意义[J]. 中国乳业, 2021, 0(10): 26-30.
[14] 郭宁宁, 张学炜, 周娟, 田雨佳. 酸化乳饲喂哺乳犊牛的研究进展[J]. 中国乳业, 2021, 0(10): 46-49.
[15] 王丽华, 徐宏建, 张全宇, 张城瑞, 张永根. 不同剂量25羟基维生素D3对断奶前犊牛血液生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响[J]. 中国乳业, 2021, 0(10): 55-60.
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