福林酚法高通量测定牛奶中蛋白酶活力的优化

doi:10.12377/1671-4393.24.07.18

中国乳业 ›› 2024, Vol. 0 ›› Issue (7): 92-97.doi: 10.12377/1671-4393.24.07.18

福林酚法高通量测定牛奶中蛋白酶活力的优化

周欢, 宋艳梅, 范光彩, 夏忠悦, 马静, 骆敏, 谭莲英, 钱成林

新希望乳业股份有限公司,四川成都 610023

出版日期:2024-07-25 发布日期:2024-08-01
作者简介:周欢（1996-）,女,四川南充人,本科,助理工程师,研究方向为乳制品质量安全与控制;宋艳梅（1982-）,女,四川成都人,本科,中级工程师,研究方向为乳品食品安全检测和风险评估;范光彩（1995-）,男,四川广元人,本科,助理工程师,研究方向为乳制品质量安全与控制;夏忠悦（1971-）,女,四川内江人,本科,高级工程师,研究方向为乳制品质量保障及食品安全风险防控;马静（1994-）,女,河北唐山人,硕士,研究方向为食品微生物检验;骆敏（1992-）,女,四川内江人,本科,助理工程师,研究方向为食品微生物检验;谭莲英（1980-）,女,重庆人,本科,中级工程师,研究方向为乳制品质量安全与控制;钱成林（1989-）,男,云南曲靖人,本科,中级工程师,研究方向为乳制品质量安全与控制。
基金资助:
四川省科技计划项目-具有减肥功效的益生菌功能特性研究及发酵乳制品产业化（2023NSFSC0018）

Optimizing of High Throughput Determination of Protease Activity in Milk Using Folin-phenol Method

ZHOU Huan, SONG Yanmei, FAN Guangcai, XIA Zhongyue, MA Jing, LUO Min, TAN Lianying, QIAN Chenglin

New Hope Dairy Co.,Ltd.,Chengdu Sichuan 610023

Online:2024-07-25 Published:2024-08-01

摘要/Abstract

摘要： [目的] 优化福林酚法测定牛奶中蛋白酶活力的试验条件,解决检测结果重复性差、检测效率不高等问题。[方法] 用酶标仪测定牛奶中蛋白酶活力,同步对比各试验条件对测定结果的影响。[结果] 酶标仪测定时,显色保温时间15 min以上、取样350 μL、福林试剂浓度0.33~0.5 mol/L时,牛奶中蛋白酶活力测定结果重复性好,检测效率高。[结论] 酶标仪测定牛奶中蛋白酶活力是一种检测效率高、结果重复性好的方法,更适合乳品企业大批量筛查牛奶中蛋白酶活力。

关键词: 牛奶, 蛋白酶, 福林酚法, 酶标仪

Abstract: [Objective] To optimize the conditions for the determination of protease activity in milk using the national standard method - Folin-phenol method. [Method] By measuring the protease activity in milk,the influence of various experimental parameters on the results was compared and analyzed. [Result] When using an enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA） reader for measurement,the color retention time should be more than 15 minutes,and a sample of 350 μL.When the concentration of Folin reagent is 0.33~0.5 mol/L,the absorbance constant K value of the standard curve meets the requirements. [Conclusion] When detecting protease activity in milk,it is necessary to control the color retention time,sampling volume,and clarity of the sample solution.After the color reaction is fully completed,the system of the standard solution and sample solution has stabilized,and there is no significant change in the absorbance value within 1 hour of further insulation or room temperature storage,which has no significant impact on the results.

Key words: milk, protease, Folin-phenol method, enzyme-linked immunosorbent assay reader

周欢, 宋艳梅, 范光彩, 夏忠悦, 马静, 骆敏, 谭莲英, 钱成林. 福林酚法高通量测定牛奶中蛋白酶活力的优化[J]. 中国乳业, 2024, 0(7): 92-97.

ZHOU Huan, SONG Yanmei, FAN Guangcai, XIA Zhongyue, MA Jing, LUO Min, TAN Lianying, QIAN Chenglin. Optimizing of High Throughput Determination of Protease Activity in Milk Using Folin-phenol Method[J]. China Dairy, 2024, 0(7): 92-97.

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